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日期:2021-07-28瀏覽:1990次
基本原理
細胞凍存時(shí)保存細胞的最基本方法,當不加保護劑直接凍存細胞時(shí),細胞內和外環(huán)境中的水會(huì )形成冰晶,從而引起細胞死亡。因此,正常情況下凍存細胞,通常會(huì )向培養液中加入保護劑,使用逐步降低溫度的方法,以減少凍存過(guò)程中細胞內冰晶形成、保護細胞。
注意事項
1、凍存細胞選擇細胞增殖旺盛、情況穩定、無(wú)污染、處于對數生長(cháng)期的細胞。
2、實(shí)驗操作過(guò)程必須遵循無(wú)菌操作。
3、細胞凍存液的配方應根據細胞的類(lèi)型進(jìn)行調整,摸索對應細胞最適的配方。
4、細胞凍存過(guò)程,降溫速率要小,遵循慢凍原則,可借助程序降溫盒來(lái)完成。
5、凍存細胞要做好標記,名稱(chēng)、日期、凍存人等。
6、選擇質(zhì)量好的凍存管進(jìn)行細胞凍存,防止管凍裂。
7、凍存細胞前要進(jìn)行細胞計數,建議一管中細胞數量為106。